### 小鼠肠道灌洗液抗体检测试剂盒背景简介

肠道屏障在维持肠道稳态方面起着关键作用，它通过防止细菌的过度吸收来保护机体。参与这一保护机制的免疫球蛋白包括分泌型IgA、IgG和IgM等。为此，PG电子合作推出了一款小鼠肠道灌洗液制备的标准方案，并配备了能够同时检测总免疫球蛋白水平与抗原特异性抗体水平的ELISA试剂盒。

抗原特异性抗体的水平可以有效反映肠道的免疫功能状态。例如，通过口服卵清蛋白（OVA）结合霍乱毒素佐剂来进行免疫，可以显著提升肠道内对OVA的IgA抗体反应。这一免疫反应可通过检测抗OVAIgA抗体的水平，并与总IgA水平进行比较来进行评估。

### 产品应用

该试剂盒的主要应用包括：

• 肠道免疫功能状态评估
• 过敏原特异性抗体检测
• 肠道相关特异性抗体检测

### 小鼠肠道灌洗液制备流程（抗体分析用）

基于Lycke等人发表的文献，我们对小鼠肠道灌洗液的制备流程进行了改进，具体步骤如下：

1. 取出小鼠小肠组织，用剪刀夹钳夹住肠道一端。
2. 使用聚四氟乙烯（PTFE）导管注射器，避免刺穿肠道，向肠腔缓慢注入3ml的蛋白酶抑制剂溶液（含0.1mg/ml胰蛋白酶抑制剂、50mM EDTA、1mM PMSF的PBS缓冲液）。
3. 夹闭肠道另一端，室温孵育10分钟。
4. 收集肠道内容物至试管中，进行剧烈涡旋震荡和超声破碎处理。
5. 在54℃条件下，1800rpm离心10分钟。
6. 取上清液转移至新管中，按1ml灌洗液添加10μl 5%Na3化钠的比例混合。
7. 室温孵育15分钟。
8. 按1ml灌洗液添加50μl正常山羊血清的比例混合。

该混合液可按照1:1的比例用ELISA试剂盒配套的样品稀释缓冲液进行稀释后进行检测。

### 产品订购及检测指标

根据不同的检测需求，以下是可选的指标：

• IgA、IgE、IgM、IgG、IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG2c、IgG3的检测
• 对大肠杆菌、脂多糖、肠毒素A与B、卵清蛋白、屋尘螨、粉尘螨及花生等过敏原的抗体检测

如需针对特定抗原、细菌或毒素的抗体评估方案，请咨询PG电子中国区总代理北京博蕾德生物科技有限公司。